「特色服务」生物电镜

如果需要研究样品的内部结构,例如细胞器的改变,则应选择透射电镜观察

如果需要研究样品表面的形态结构,如细胞的外形、细胞的生长形态等,则应选择扫描电镜观察

一、生物电镜设备介绍

设备一：生物透射电镜

型号：JEM-1400Flash

制造厂家：JEOL公司

技术参数：

1.TEM分辨率 (nm)：0.2

2.加速电压：10 ～ 120kV

3.倍率 （TEM）：×10～1,200,000

4.样品倾斜角*1：Tilt-X ±70°(高倾斜样品杆)

设备二：生物钨灯丝扫描电镜

型号： S-3000N

制造厂家：HTACHI公司

技术参数：

1.点分辨率：6nm

2.最大放大倍数：20万倍

3.最大加速电压：30KV

设备三：生物冷场发射扫描电镜

型号： REGULUS8220

制造厂家：HTACHI公司

技术参数：

1.二次电子分辨率：0.7 nm（加速电压 15 kV）；0.9 nm（着陆电压 1 kV）*2

2.加速电压：0.5~30 kV

3.着陆电压：0.01~20 kV

4.倍率：20~2,000,000倍*3

5.马达台控制 5轴自动

电镜配套冷冻传输系统，鲜活样品直接冷冻条件下切片检测

（2）｜生物电镜检测流程

二、选择电镜

1、如果需要研究样品的内部结构,例如细胞器的改变,则应选择透射电镜观察

2、如果需要研究样品表面的形态结构,如细胞的外形、细胞的生长形态等,则应选择扫描电镜观察

生物样品取材、固定、保存

1、透射电镜样品:

1) "快速"：指尽量在活体条件下取材或动物断血后2分钟内取材,并迅速将组织放入电镜专用3.5%戊二醛固定液内(不可用酒精或消毒级戊二醛固定),并于4℃冰箱内保存,切忌样品结冰。

2) "准确"：指取材部位要准确。取材的器械要锋利,尽量减少对组织的牵拉和挤压。

3) "体积小、低温"：指组织厚度不应大于3mm,取材温度最好控制在4℃左右进行操作。

2、扫描电镜样品

1) 取材时还应尽量保护观察面,避免用镊子夹持观察区域,在固定前,通常应用适当的清洗液清洗样品表面的杂质,灰尘,粘液等附着物。

2) 常用的清洗波有蒸馏水、生理盐水、各种缓冲液或含酶的清洗液。

3) 样品取好后,放入3.5%戊二醛固定液内固定,保存在4℃冰箱中，切忌样品结冰。

三、流程

1、透射电镜

取样——3.5%戊二醛前固定；1%鐵酸后固定——酒精、丙酮逐级梯度脱水——Epon-618渗透、包理——半薄切片——光镜选区定位——修块——超薄切片机切片——柠檬酸铅、醋酸铀双染色——透射电镜观察——摄片——分析+报告

2、扫描电镜样品

1) 取材——清洗——固定——冷冻——SEM观察（冷冻电镜）

2) 取材——清洗——固定——脱水——干燥——镀膜——SEM观察（常规检测）

3) 取材——清洗——固定——组织导电处理——脱水——SEM观察（特殊样品，例如外泌体）