脂质体生产优化

脂质体技术被喻为“生物导弹”的第四代靶向给药技术，也是目前国际上最热门的的制药技术。脂质体（Liposome）作为一种药物传输的剂型，与人体的生理相容性非常好，能够兼顾安全性和有效性。脂质体膜作为人工合成膜的另一优势是，可以进行各种功能修饰，从而具备更多的延伸功能，如靶向性、长循环等。脂质体制剂品质的优劣主要取决于其粒度大小及其分布，而人体组织器官更倾向于吸收粒度小且分布均匀的药物脂质体，从而影响药物脂质体的有效性。粒径控制对脂质体产品的稳定性、药代动力学、包封率等都有影响。美国药典FDA指定纳米粒子应该控制的关键质量属性包括粒径分布，测量纳米粒子大小的方法中含有电阻感应脉冲（RPS）。

01、脂质体粒径控制方法

脂质体是由类似细胞膜的磷脂双分子层组成，主要是由磷脂和胆固醇组成。磷脂是膜结构的基础，胆固醇则嵌入磷脂层中间，起到稳定膜结构的作用。脂质体具有亲水亲脂性，磷脂亲水性头部聚集朝向水性界面，疏水性尾部聚集形成稳定封闭的囊泡结构。脂质体给药系统属于非均相热力学不稳定系统，脂质体在制备过程中，若粒径大小及分布不合格，则会影响产品后续质量问题。因此，粒径大小和分布是关键质量属性。目前，粒径控制常见的方法有：剪切法、均质法、微流控、超声法及薄膜挤压法。

02、脂质体粒径影响因素

脂质体膜是动态膜磷脂分子间不断交换位置，脂质体颗粒可以自发的聚集、沉淀造成脂质体物理形态结构的不稳定，粒径是影响稳定性的重要因素。

• 靶向作用：如50nm-150nm的LNP靶向肿瘤细胞，500nm-5um的LNP靶向脾脏器官。
• 稳定性：粒径对脂质体的稳定性影响很大，不同的粒径的脂质体受外界环境和内因素影响发生物理变化和化学改变的程度也不同，比如10～50nmLNP是不稳定的，小于150nm的脂质体可以减少肝、脾的摄取。
• 药物有效性：粒径大小在体内停留的时间不同。
• 包封率：粒径影响着包封率，粒径减小会造成包封率下降。
• 人体安全性：例如大于5um的LNP 会在肺部栓塞。

03、粒径的检测方法

美国药典FDA指定纳米粒子应该控制的关键质量属性包括粒径分布，测量纳米粒子大小的方法中含有电阻感应脉冲（RPS）。

库尔特原理(亦称:RPS):悬浮在电解液中的颗粒随电解液通过小孔时,取代相同体积的电解液,在恒电流设计的电路中导致小孔管内外两电极间电阻发生瞬时变化,产生电位脉冲。脉冲信号的大小和次数与颗粒的大小和数目成正比。库尔特原理属于对颗粒个体的测量和三维的测量,不但能准确测量物料的粒径分布,更能作粒子绝对数目和浓度的测量。其所测粒径更接近真实,而且不会受物料的颜色和浓度的影响。

04、Nanocoulter纳米库尔特粒度仪在脂质体药物生产过程的应用

1、粒径控制方案

Nanocoulter单颗粒、高精度检测可清晰的看到粒径控制前后样本的变化情况，帮助客户快速优化粒径控制方案 。

2、生产方法优选

不同的制备方法生产出来的脂质体粒径差异巨大，需要一种高精度的脂质体表征方法来指导生产方法的选择。而纳米库尔特粒度仪，可以优选出最合适的制备方法。下图为四种生产方法制备的脂质体粒径分布图，其中方法三的粒径分布最均匀。

Nanocoulter依据检测原理的天然优势，直接测量过孔颗粒的等体积粒径。每过去一个颗粒检测出对应的粒径等数据，是真正意义上的单颗粒检测。Nanocoulter不但能准确测量样品的粒径分布,还能测量粒子数目和浓度，所测粒径更接近真实,而且不会受物料的颜色和浓度的影响。

Nanocoulter助您优选生产方法，赢在起跑线上。当然，瑞芯智造仍会致力于打造检测更精确、应用更全面的纳米粒度仪，我们还会不断探索研究，以期能做到更优更好，希望能在脂质体载药领域的研究发展提供更强的助力。